INTRODUZIONE. I microRNA (miR) sono molecole di 20-30 nucleotidi non codificanti regolatori di numerosi processi biologici. Studi hanno associato l'up-regolazione del miR-155 a incremento della risposta infiammatoria. Il nostro scopo era analizzare: A): l’espressione del miR-155 nelle PBMC (Peripheral Blood Mononuclear Cells) di pazienti cronicamente in emodialisi; B): l’espressione del miR-155 nelle PBMC dopo contatto del sangue con membrane dialitiche a bassa permeabilità, al termine del periodo interdialitico lungo, prima e dopo seduta emodialitica di 4 ore; C): l’espressione del miR-155 nelle PBMC di emodializzati dopo 24 ore in terreno di coltura, stimolando parte di esse.
METODI. A) e B): il miR-155 è stato isolato direttamente da PBMC di 7 individui sani (30-50 anni, 3F-4M) e 9 pazienti in emodialisi (50-75 anni, 1F-8M); C): il miR-155 è stato isolato da PBMC di 6 pazienti in emodialisi (50-75 anni, 3F-3M) mantenendo le cellule 24 ore in terreno di coltura (RPMI, FBS 10% e antibiotico 1%) e stimolando metà di ciascun campione con PHA. Il miR-155 è stato successivamente isolato mediante apposito kit commerciale e quantificato con real-time PCR. Tutti i soggetti non presentavano malattie ematologiche, infiammatorie o neoplastiche. I dati sono espressi in media±errore standard; le significatività statistiche sono ottenute mediante t-test.
RISULTATI. A): nei pazienti emodializzati, la 'Relative Quantity' (RQ) del miR-155 pre-dialisi, proveniente da PBMC direttamente processate dopo prelievo da sangue periferico, era 3,77±0,62 volte maggiore rispetto ai controlli sani(P=0,003). B): non sono state riscontrate differenze di RQ tra inizio e termine della seduta emodialitica: RQ nel post-dialisi vs controlli 3,49±0,70 (P=NS vs. pre-HD). C): l'RQ del miR-155 pre-dialisi nelle PBMC stimolate con PHA era 1,79±0,59 volte maggiore rispetto alle cellule coltivate ma non stimolate (P=0,019).
Questi dati preliminari mostrano: A): una significativa up-regolazione del miR-155 nei pazienti emodializzati rispetto ai soggetti sani; B): nessuna up-regolazione del miR-155 indotta dall'interazione tra PBMC e membrane a bassa permeabilità; C): un’ulteriore up-regolazione del miR-155 in PBMC stimolate rispetto a PBMC in coltura semplice.